枸杞花中总多酚含量的测定(2)

人气指数:点发布时间:2014-10-24 01:50 来源：http://www.zgqkk.com 作者：程刘柯等

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　　2）多酚类化合物标准曲线的绘制：精确吸取没食子酸标准溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL，于已标记好0、1、2、3、4、5、6、7号的25 mL棕色容量瓶中；再依次加入Folin-Ciocalteu试剂1 mL和7.5%碳酸钠溶液8 mL；最后用去离子水定容到25 mL；充分混匀，在50 ℃水浴下保持10 min；迅速冷却。以0号作对照，于753 nm处测定不同浓度的没食子酸对应的吸光值。其中，0-7号标准样最终得到的浓度为0.000、0.001、0.002、0.003、0.005、0.006、0.007 mg/mL。做3组重复，取平均值，绘制标准曲线，并得出回归方程。

　　3）样品水提取物中多酚类化合物的测定：将样品水提取物稀释10倍；精确吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL液体于已标记好0、1、2、3、4、5、6号的25 mL棕色容量瓶中。其余步骤同上。做3组重复，以0号作对照，于753 nm处测定吸光度。取平均值，记录各组数据，绘制出吸光度随样品水提取物体积变化的曲线。在曲线上找到样品水提取物稀释10倍，取1 mL样品所得到的吸光度值，根据标准曲线得到相对应的没食子酸的浓度，进而得出样品水提取物的多酚类化合物的含量。

　　4）样品95%乙醇提取物中多酚类化合物的测定：精确吸取样品95%乙醇提取物溶液0.0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5、2.0 mL于已标记0、1、2、3、4、5、6号的25 mL棕色容量瓶中，其他步骤同样品水提取物的测定步骤。记录各组数据，绘制出吸光度随样品95%乙醇提取物体积的变化曲线。在曲线上找到1 mL 95%乙醇提取物溶液所对应的吸光度值，根据标准曲线得到相对应的没食子酸的浓度，进而得到95%乙醇提取物的多酚类化合物的含量。

　　由水提取物与95%乙醇提取物分别测定的多酚类化合物的含量可得出5 g枸杞干花粉末中含有的多酚类化合物的含量。

　　2 结果与分析

　　2.1 不同溶剂提取所得体积

　　样品水提取物的总体积为81 mL，样品95%乙醇提取物的总体积为126 mL。根据样品的总体积计算多酚类化合物和黄酮类化合物的总量。

　　2.2 多酚类化合物结果分析

　　在400～900 nm范围内进行扫描，检测出最大吸收峰波长为753 nm。由以上数据及曲线（表1-表3；图1-图3）表明，多酚类化合物标准曲线的线性回归方程为：y= 100.500 0x+0.013 5（R2=0.999 3）。以没食子酸为标准品测定的多酚类化合物标准曲线呈现较好的线性关系。

　　样品水提取物稀释10倍后，测定多酚类化合物得到的线性回归方程为：y=0.325 2x-0.006 0 （R2=0.998 3）。则样品水提取物稀释10倍后，取1 mL测定的吸光度为0.319 2，由标准曲线得到的没食子酸浓度为0.003 0 mg/L，则样品水提取物的多酚类化合物总量为60.75 mg。样品95%乙醇提取物中多酚类化合物测定得到的线性回归方程为：y= 0.399 3x+0.045 5 （R2=0.993 4）。同样的可以计算出样品95%乙醇提取物中多酚类化合物总量为13.55 mg。可知多酚类化合物大多可溶于水，水溶性的多酚类化合物为醇溶性的4.48倍。5 g枸杞干花中含有的多酚类化合物为74.30 mg，即枸杞花中多酚类化合物含量约占1.49%。

　　3 小结与讨论

　　采摘的宁夏本地的枸杞花阴干后，对干枸杞花依次采用水、60%、85%、95%乙醇反复提取，并借用超声波（40 kHz）在50 ℃下提取50 min。得到的提取物经减压浓缩，真空抽滤等步骤，最终得到水相（样品水提取物为81 mL）和醇相（样品95%乙醇提取物为126 mL）两种提取物。采用Folin-Ciocalteu法，以没食子酸为参照品，在753 nm处测定样品水提取物、95%乙醇提取物中多酚类化合物，得到两者含量分别为60.75 mg和13.55 mg，很显然水相中的多酚类化合物比醇相中的多，是其4.48倍，其中总多酚类化合物含量为74.30 mg，约占干枸杞花的1.49%。

　　参考文献：

　　[1] 尹志娜.植物多酚分离提取方法和生物功能研究进展[J].生命科学仪器，2010，8（6）：43-49.

　　[2] 李群梅，杨昌鹏，等.植物多酚提取与分离方法的研究进展[J].保鲜与加工， 2010，10（1）：16-19.

　　[3] 李健，杨昌鹏.植物多酚的应用研究进展[J].广西轻工业， 2008（12）：1-3.

　　[4] 陈曌，曾健青，左雄军，等.迷迭香脂溶性抗氧化剂总酚测定及其稳定性研究[J].中国食品添加剂，2011（2）：83-86.

　　[5] 陈晨，文怀秀，罗智敏，等.白刺色素和黑果枸杞色素中花色苷与总多酚的测定[J].光谱实验室.2010，27（5）：1796-1798.

　　[6] 沈剑明，刘晓峰.宁夏枸杞的花联合现象[J].西北植物学报， 1990，10（3）：221-224.

　　[7] 刘兰英，曹有龙.枸杞花花色素提取工艺研究[J].安徽农业科学， 2010，38（32）：18140-18141.

　　[8] 贝盏临，张欣，曹君迈，等.枸杞花总黄酮的测定[J].湖北农业科学，2012，51（6）：1240-1241.

　　[9] 张欣，曹君迈，贝盏临，等.枸杞花抗氧化作用的研究[J].江苏农业科学，2012，40（3）：301-303.

　　[10] 韩菊，魏福祥.Folin-Ciocalteu比色法测定苹果渣中的多酚[J]. 食品科学，2010，31（4）：179-182.

　　[11] 李巨秀，王柏玉.福林-酚比色法测定桑葚中的总多酚[J].食品科学，2009，30（18）：292-295.