桑杏平喘颗粒对小白鼠的急性毒性试验
近年来猪场的规模化养殖程度越来越高,但饲养管理方式和卫生条件仍然相对落后,伴随而来的问题是猪病复杂化趋势日益严重,给养殖户造成了巨大的经济损失。猪支原体肺炎(Mycoplasmalpneumoniaofswine,MPS)是由猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp)引起的一种接触性、慢性呼吸道疾病,以咳嗽、喘气、呈腹式呼吸为特征性症状,在猪群中可造成地方性流行;患猪生长发育迟缓,饲料利用率降低,若不及时治疗,易继发混合感染猪巴氏杆菌、放线杆菌、圆环病毒(PCV)、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒等多种传染病,最后导致成猪呼吸道疾病综合征(PRDC),对养猪生产危害很大,给该病的免疫和防治带来了很大困难。另外临床上常用的猪支原体减毒疫苗存在产量低、成本高、反应较大等缺陷,采用胸腔注射的免疫途径也不容易被一般用户所接受,因而在推广应用上受到限制。而中药通过对动物的生理机能进行综合调理,提高机体非特异性免疫力,发挥其抗菌、抗病毒、抗应激的自身优势,从而可以有效地防控和治疗该病,并取得了一定的效果;且兼有低毒、低残留、无耐药性等优点,符合当前人们对畜产品安全的需求。
桑杏平喘颗粒是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所自主研发的,根据中兽医辨证观和整体观,选择具有清热宣肺、止咳平喘功能的桑白皮、杏仁、石膏、甘草等中药辨证组方而成,利用现代制药工艺研制而成的用于防治猪支原体肺炎的中兽药新制剂。为了解其对动物的毒性反应及为临床安全用药提供科学的数据支持,以小白鼠为试验动物进行了急性毒性试验,现报道如下。
1材料与方法
1.1材料
昆明系小白鼠,18~22g,50只,雌雄各半,购自兰州大学医学院动物中心。
桑杏平喘颗粒来自中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所。试验前将桑杏平喘颗粒用灭菌水配成相当于原药材10g/mL的浓溶液,待用。
1.2方法
将50只小白鼠在实验室条件下适应性饲喂3d后,随机分成5组,每组10只,雌雄各半。禁食8h(不禁水)后,分别按生药250.00g/(kg·bw)、300.00g/(kg·bw)、360.00g/(kg·bw)、432.00g/(kg·bw)、518.40g/(kg·bw)灌胃给药,1次给药量≤0.8mL,低剂量组一次给药,高剂量组可以在24h内分两次给药。观察给药后小白鼠的精神、行为、饮食欲等情况,记录小白鼠死亡时间和数量,剖检死亡小白鼠,观察各脏器组织的病理变化。试验共7d,试验结束后统计小白鼠的死亡数。用SPSS13.0软件计算桑杏平喘颗粒对小白鼠的LD50及其95%可信限。
2结果与分析
用灌胃针经口灌入已制备好的药物后,大部分小白鼠表现静伏少动,自发活动减少,行动迟缓,个别小白鼠出现运动失调,呼吸急促或明显的神经症状,随着剂量的增大其症状加剧。小白鼠死亡前出现后肢抽搐症状,被毛粗乱,皮肤发绀,呼吸困难。7d后存活的小白鼠饮食欲良好,精神好转,活动正常,被毛柔顺而有光泽。死亡的时间主要集中在灌药后1~2h,解剖观察主要的脏器病变为:十二指肠出血,肝脏颜色发暗,有不明显的出血、淤血,其他脏器无明显的眼观病变。7d之内5组小鼠分别死亡0、4、9、9、10只,见表1。
由SPSS13.0软件通过Bliss方法计算出桑杏平喘颗粒对小白鼠的LD50及其95%可信限,LD50为319.16g/(kg·bw),95%的可信限为270.31~363.68g/(kg·bw)。
3小结与讨论
猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性呼吸道疾病,感染率高,流行快,新发病的猪群中常呈暴发性流行,发病率和死亡率都很高,且多为急性经过;老疫区病猪多呈慢性经过,易与巴氏杆菌、猪圆环病毒等混合感染,长期携带致病微生物并向外传播,所以猪支原体肺炎是目前及今后很长一段时间内影响养猪生产的主要疾病之一,也是全球养猪界公认的最难净化的疫病[1]。目前,化学药物防治的效果不理想,初期会有一定的防治效果,但是伴随这些药物的长期使用,病原菌的耐药性会大大降低药物的有效性。同时,大量使用化学药物造成的动物产品残留问题日益引起人们的重视,难以满足人们对畜产品安全性的要求。抗生素只能抑制支原体生长,无法完全清除,使用药物是为了缓解病情,降低继发感染,一旦停止用药容易复发,并且支原体的耐药性强,在肺部黏膜表面的有效浓度低,因此抗生素的效果很难保证[2]。使用疫苗也可以在一定程度上起到预防的作用,目前国内自主研发的相关疫苗只有弱毒疫苗,但是该疫苗由于需要胸腔接种所以不易于推广普及,进口的灭活疫苗虽易操作但成本过高[3]。
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