样品中蛋白质的含量（mg/gFW）=C×VT×V1×FW×1000

　　式中，C——查标准曲线值（μg）；

　　VT——提取液总体积（mL）；

　　FW——样品鲜重（g）；

　　V1——测定时加样量（mL）。

　　2.4丙二醛含量的测定

　　称取叶片2g至洁净研钵，加入4mL10%TCA和少许石英砂迅速研磨，再加16mLTCA后继续研磨至匀浆，取匀浆4000g离心10min，分离取上清液4mL，加入4mL0.6%TBA溶液，充分混匀后沸水浴反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液分别测定532nm、600nm和450nm波长下的消光度。根据植物组织的重量计算测定样品中MDA的含量：

　　MDA（μmol/gFW）=MDA浓度（μmol/L）×提取液体积（mL）/植物组织鲜重（g）

　　3结果与分析

　　3.1干旱胁迫下香樟苗期游离Pro的变化对于干旱胁迫，渗透调节是植物适应干旱胁迫的主要生理机制之一[11]。从图1可以看出，随着干旱胁迫时间越长，植物体内游离脯氨酸积累越多。大量积累的脯氨酸作为渗透调节物质有助于提高细胞液浓度，降低渗透势，提高细胞保水能力。试验结果发现干旱胁迫下香樟叶片中游离脯氨酸含量有明显在增加，表明香樟具有对干旱胁迫的伤害产生应答并迅速自身积累渗透调节物质来减缓伤害的能力。

　　3.2干旱胁迫对香樟苗期相对电导率的影响

　　在胁迫过程中，细胞往往因胁迫而出现细胞膜受损、破裂甚至完全裂解，造成细胞液外渗，因此植物细胞外渗液电导率的变化既能反映出细胞质膜受伤害的情况，也能反映品种的抗性强弱，可作为衡量胁迫损伤和育种选择的生理生化指标。由图2可知，随着胁迫时间的增加，香樟叶片组织中相对电导率逐渐增大，这表明，胁迫随时间的增加对香樟幼苗的伤害也在逐渐增加。

　　3.3干旱胁迫对可溶性蛋白质含量的影响

　　从图3整个趋势来看，随着胁迫程度的增大，香樟幼苗可溶性蛋白质的含量呈现减少趋势，说明干旱胁迫下，蛋白质的合成受阻，或蛋白质的分解加速，导致其含量下降。胁迫时间延长，蛋白质含量的下降明显，幅度较大。分别对胁迫3d、6d、9d和12d的可溶性蛋白质相对含量与水分梯度进行相关分析，相关系数分别为0.964、0.976和0.991，达到极显著水平。水分条件好，蛋白质含量叶较高；反之，水分条件差，渗透性低，蛋白质含量也较低。

　　3.4干旱胁迫下MDA含量的变化

　　MDA是细胞膜膜脂过氧化最终分解产物，植物组织中MDA含量高低往往可以反映其遭受伤害的程度。如图4显示，在干旱胁迫试验的前3d，幼苗叶片MDA含量不变化明显，干旱胁迫3～9d，含量有明显增加的趋势，说明试验前期，模拟胁迫对香樟造成的伤害并不大，细胞膜未发生大量的膜脂过氧化，而到随着胁迫时间延长，胁迫造成的伤害则明显加重，组织细胞膜膜脂过氧化加剧，从而使得MDA含量急剧上升。

　　参考文献

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　　[10]李合生.植物生理生化实验技术和原理[M].北京：高等教育出版社，2001.

　　[11]CentrittoM.Photosyntheticlimitationsandcarbonpartitioningincherryinresponsetowaterdefitandelevated[CO2][J].AgricultureEcosystems&Environment，2005，106：233.

 

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