不同培养基类型对薄荷组织培养的影响
摘 要:以薄荷茎段为外植体,研究了4种不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响。结果表明:1/2MS培养基愈伤组织诱导率最高,为100%,N6培养基愈伤组织的生长量最高;B5培养基芽的诱导率最高,为40%,但1/2MS培养基芽的长势较好;1/2MS培养基最适合根的诱导,诱导率为82.5%。综合分析确定薄荷愈伤组织和根系诱导的最适宜培养基为1/2MS培养基,芽分化的最适宜培养基为B5培养基。
关键词:薄荷;组织培养;培养基;诱导率
中图分类号:S567.23+5.035.3 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2014)11-0030-03
薄荷(Mentha canadensis L.)是唇形科多年生宿根性草本植物,味甘辛,性凉,归肺、肝经,具有清利头目、透疹、杀菌消炎等功效[1],在我国自古就有药食兼用的传统。目前,薄荷已被广泛应用于医学、食品、化妆品等工业,具有很高的经济价值。薄荷繁殖方式以扦插、种子和秧苗繁殖为主,存在品种更新缓慢、易感染病毒等缺点。应用组织培养技术可克服薄荷传统繁殖方式的缺点,已有诸多专家进行了相关研究[2~6]。本试验以薄荷的茎段为外植体,研究不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对薄荷愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响,以利于薄荷组织培养中不同诱导目的适宜培养基的筛选。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试品种为葡萄柚薄荷(Mentha suaveolens× piperita),选取无病且生长健壮的葡萄柚薄荷茎段作为外植体,剪去茎段外层大叶片,用洗衣粉水和清水洗净,滤纸吸干其表面水分备用。
1.2 试验处理
试验于2013年4月至2013年11月进行,选取较常用的4种培养基:MS、1/2MS、B5、N6,培养基加琼脂8 g/L,蔗糖30 g/L。薄荷愈伤组织诱导的试验处理见表1,薄荷芽和根诱导的试验处理见表2。
1.3 接种外植体
将薄荷茎段置于干净烧杯中,先用75%酒精浸泡15 s,无菌水冲洗1~2次,再用 0.1% HgCl2浸泡60 s,无菌水冲洗多次。待滤纸吸干其表面水分后,切取0.5 cm长的茎段,接种到培养基上。
4月19日将薄荷外植体接种于1、2、3、4号培养基内,每个处理接种6瓶,每瓶接种5个,共30个外植体。7月9日、10月11日分别将薄荷外植体接种于5、6、7、8号培养基内,每个处理接种8瓶,每瓶接种5个,共40个外植体。
1.4 培养条件及观察
保持干球温度14.8℃,湿球温度(25±2)℃;光照强度为1 500~2 000 lx,12 h光暗交替处理。每天观测外植体分化情况,统计外植体开始萌动的时间,记录愈伤组织、芽、根的诱导及生长情况,并进行比较分析。
2 结果与分析
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