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靖江香沙芋组织培养快繁技术(2)

人气指数: 发布时间:2015-04-20 10:51  来源:http://www.zgqkk.com  作者: 韩晓勇等
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  2.2芽诱导分化
  从表2可以看出,MS+0.5 mg/L TDZ和MS+1.0 mg/L TDZ培养基芽诱导率及芽长势优于另外几种培养基。其中以MS+0.5 mg/L TDZ培养基芽诱导率最高,为80%,芽高度为2.3 cm(图1-A)。TDZ与6-BA 2种植物生长调节剂对芋芽诱导及生长的影响差异较大,与6-BA相比,TDZ对芽分化率及株高差异都达到显著水平,经25 d就能诱导茎尖长成2~3张叶。随着6-BA与NAA配比浓度的提高,芽分化率呈上升趋势,但株高及展开叶数呈下降趋势。当 6-BA ∶NAA=4.0 ∶0.2时,叶片容易发生卷曲。表2不同激素浓度和激素种类对芽诱导的影响
  激素种类及浓度接种数
  (个)分化数
  (个)分化率
  (%)株高
  (cm)展开叶数
  (张)植株表现6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L154c26.7c1.4c1b芽矮小6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L153c20.0c1.3c1b芽矮小6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L157b46.7b1.8b2ab芽矮小6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L157b46.7b1.4c1b叶片卷曲TDZ 0.5 mg/L+IBA 0.0 mg/L1512a80.0a2.3a3a正常TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.0 mg/L1511a73.3a2.3a3a正常TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.4 mg/L158b53.3b1.7b2ab芽粗短注:同列数据后不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。表3、表4同。
  2.3继代增殖
  由表3 可以看出,诱导丛生芽增殖最适宜培养基为MS+1.0 mg/L TDZ,丛生芽分化速度快,增殖倍数可达4.3(图1-B),与其他处理差异显著。方差分析结果显示,TDZ对芽增效系数显著高于6-BA。随着6-BA与NAA配比浓度的提高,增殖系数呈先升后降的趋势。当6-BA ∶NAA=4.0 ∶0.2 时,增殖系数和芽均较小。
  2.4生根培养
  由表4可以看出,不同激素浓度对组培苗生根影响较大。其中激素浓度为6-BA ∶NAA=0.1 ∶0.5时生根效果最好,平均生根时间为11 d,生根率达100%,30 d的根系长度、叶片数以及株高均显著高于其他处理,分别为2.9 cm、3.5张和5.6 cm(图1-C)。随着NAA浓度增大,根系长度、叶片数和株高都有不同程度的下降,根系逐渐变短变粗,最终呈鸡爪
  表3不同激素浓度和激素种类对芽增殖的影响
  激素种类激素浓度
  (mg/L)接种数
  (个)芽数
  (个)增殖系数生长描述6-BA/NAA1.5/0.22034e1.7e芽较小2.0/0.22042d2.1d芽较大4.0/0.22032e1.6e芽很小TDZ/IBA0.5/0.02078b3.9b正常1.0/0.02086a4.3a正常1.0/0.42075c3.75c易生根
  状,并伴有少量气生根出现。组培苗培养45 d左右(图1-D)移入苗床营养土中,15 d后开始长出新叶,30 d时成活率达100%(图1-E)。
  3讨论
  TDZ(苯基噻二唑基脲)是一种人工合成的苯基脲重氮噻唑取代衍生物。Mok等首次发现TDZ有很强的细胞分裂素活性,浓度很低的TDZ能促进利马豆(lima bean)愈伤组织生长[6]。Chand等发现,在芋茎尖分生组织培养中,与BA相表4不同激素浓度对生根的影响
  NAA
  (mg/L)6-BA
  (mg/L)接种数
  (个)生根时间
  (d)生根苗数
  (苗)生根率
  (%)平均根长
  (cm)叶片数
  (张)株高
  (cm)植株表现0.50.1151115100a2.9a3.50a5.6a细长1.00.1151315100a1.7b2.80b3.4b粗短2.00.1151315100a1.2c2.25c2.8c鸡爪状,气生根4.00.1151315100a1.0c2.50bc2.9c鸡爪状,气生根
  比,MS培养基中添加一定浓度的TDZ可以增强外植体的活力[7]。本试验结果表明,与6-BA相比,TDZ更适于促进芋茎尖萌动、生长及丛生芽增殖,与崔瑾等得出的TDZ在不同基因型芋组织培养的生理效应和TDZ对茎尖生长的影响结论[8-9]一致。适宜靖江香沙芋芽分化的培养基为MS+0.5~1.0 mg/L TDZ,其中以MS+0.5 mg/L TDZ的培养基芽诱导率和芽的高度方面表现最好;丛生芽增殖最适宜培养基为MS+1.0 mg/L TDZ,丛生芽分化速度快,增殖倍数可达4.3。林文丽等在海门香沙芋的组织培养中认为TDZ与IBA适当浓度配比有利于丛生芽的增殖[2],本试验结果表明,添加IBA反而利于组培苗生根,形成差异的原因可能与品种的基因型有关。

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