乐舒洗液是广西柳州市妇幼保健院的传统制剂（批准文号：桂药制字Z02060005），其主要成分有蛇床子，苦参，黄柏，鹤虱，白鲜皮，百部，花椒等，具有抗菌，消炎，止痒，收敛，杀灭阴道滴虫等作用。方中蛇床子为君药，所含主要有效成分蛇床子素具有抗菌、止痒、抗变态反应、增强免疫力等作用[1-2]。原标准中无主要成分含量的测定项，为加强对该制剂的质量控制，保证制剂疗效，笔者在参考有关文献[3-12]的基础上，采用高效液相色谱法同时测定了制剂有效成分苦参碱和蛇床子素的含量。

　　1 仪器与试药

　　岛津LC-20AT四元梯度高效液相色谱系统（LC-20AT泵，Rheodyne 7725i型进样阀，SPD-20A紫外检测器，CTO-20A柱温箱，DGu-20A在线脱气机，日本岛津），PHS-3C型PH计（上海精密科学仪器有限公司），KQ-300DB型数控超声波清洗器（昆山市超生仪器有限公司），HANGPINGFA1004型电子天平（上海天平仪器厂）。

　　苦参碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110 805-200508），蛇床子素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110822-200305）。甲醇、乙腈为高效液相色谱纯试剂，水为重蒸馏水，其他使用试剂均为分析纯，乐舒洗液（柳州市妇幼保健院制剂室，批号：20120810、20120704、20120516、20110701、20110421）。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　色谱柱：Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5.0 μm）柱；柱温30℃；流动相为乙腈-0.2%三乙胺（磷酸调pH 7.0）梯度洗脱（0～5 min：28%乙腈，9～20 min：72%乙腈，23～28 min：28%乙腈）；流速1.0 mL/min；检测波长：220 nm（0～10 min）和320 nm（10～28 min）；进样量为20 μL。

　　2.2 溶液制备

　　2.2.1 对照品溶液 精密称取苦参碱对照品22.5 mg至容量瓶中，加甲醇溶解并定容至10 mL，即得苦参碱对照品储备液。精密称取蛇床子素对照品18.4 mg，加甲醇溶解并定容至10 mL，即得蛇床子素对照品储备液。储备液置-20℃冰箱保存。临用前，精密取蛇床子素对照品储备液2.0 mL，加甲醇稀释并定容至10 mL，即得368.0 μg/mL的蛇床子素对照品工作液；精密取该蛇床子素稀释液1.0 mL，加甲醇稀释并定容至10 mL，即得36.8 μg/mL的蛇床子素对照品工作液。

　　2.2.2 供试品溶液 乐舒洗液超声30 min后，精密量取4 mL置10 mL具塞玻璃试管中，加0.5 mL浓氨溶液，用4 mL乙酸乙酯振摇提取1 min，2000 r/min离心1 min，分取有机相至另一个10 mL离心管中置95℃水浴氮气吹干，共提取4次（每次4 mL）。精密加2 mL甲醇至离心管中，涡旋溶解残渣，用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。

　　2.2.3 阴性样品溶液 另按处方比例取缺苦参和缺蛇床子的药材，按照乐舒洗液制备工艺制备缺苦参和缺蛇床子阴性样品，再按供试品溶液制备方法操作即得缺苦参和缺蛇床子阴性样品溶液。

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