【摘要】目的：通过检测PCNA在卵巢良性肿瘤及卵巢癌的表达水平，分析其与卵巢癌各项临床病理指标的联系，研究PCNA在卵巢癌发病过程中的作用，探讨其在诊断治疗卵巢癌的临床意义。方法：采用免疫荧光法检测PCNA在卵巢癌及卵巢良性肿瘤中的表达。结果：（1）卵巢癌组PCNA表达水平明显高于卵巢良性肿瘤组，P<0.01，差异有极显著性。（2）PCNA表达与卵巢癌患者的临床分期，组织学分级及淋巴结转移相关，P<0.05。结论：PCNA对卵巢癌敏感。

　　【关键词】PCNA；卵巢癌患者；肿瘤组织；表达及意义

　　【中图分类号】R318【文献标识码】A【文章编号】1004—7484（2013）11—0007—02

　　卵巢肿瘤是女性生殖器常见肿瘤之一，其死亡率占居妇科恶性肿瘤的首位[1.2]。因卵巢位于腹腔内，2/3以上的病人已经是III期以上的进行期癌。因此，发现新的肿瘤标记物，早期有意义的检测卵巢肿瘤，及时阻断肿瘤转移，同时又可以准确判断预后是卵巢癌防治的重要研究课题。最近几年，国内外研究者新发现PCNAmRNA一般仅积聚在增殖细胞中，在静止细胞中则较缺乏，可很好地反映细胞动力学的变化，代表细胞增殖的潜能。因此检测PCNA可以反映癌细胞DNA的合成情况，为癌细胞增殖活性提供客观指标。本研究根据现有的实验条件利用免疫荧光技术检测细胞增殖活性相关的指标PCNA在卵巢癌中的表达，旨在探讨PCNA的表达与卵巢癌盆腔淋巴结转移、临床分期、组织学分级等临床病理特征间的相互关系，期望为卵巢癌的诊断、治疗和预后提供有效的监测指标。

　　1材料与方法

　　1.1标本来源66例卵巢癌标本取自齐鲁医院妇科2008年7月一2009年7月手术切除的存档组织蜡块，每个蜡块进行4μm厚连续切片做免疫荧光。对照组为我院同期因良性病变手术切除的良性卵巢组织存档组织蜡块20例。按临床分期：I-II期32例，III-IV期34例；按病理分级：G1.18例，G2G348例。同期住院的卵巢良性肿瘤患者20例为卵巢良性肿瘤组。所有患者术前均未接受放疗、化疗及激素治疗。所有病例均有完整、详细的临床病理资料。

　　1.2试剂和方法：PCNA兔抗人单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。本实验采用免疫荧光组织化学方法，以PBS代替一抗作空白对照。

　　1.3结果判定：PCNA以胞核中出现红色颗粒为阳性，免疫组化根据阳性细胞所占比例及荧光强度分别记分O～3分。（1）荧光强度：无荧光或极弱的荧光为0分，荧光较弱但清楚可见为1分，荧光明亮为2分，荧光闪亮为3分。（2）阳性细胞百分比：高倍镜（×400）下随机选取10个视野，每个视野计数100个细胞。取平均值作为阳性细胞百分数。阳性细胞数<5%为O分，阳性细胞数5%～25%为1分，阳性细胞数26%～50%为2分，>50%为3分。（3）根据这两项指标的计分和分为4级，即O～1分为阴性（一），2分为弱阳性（+），3～4分为阳性（++），5～6分为强阳性（+++）。

　　1.4统计学分析：应用SPSS13.0统计软件进行数据处理。进行卡方检验等统计学分析。P<0.05认为有统计学意义。

　　2结果

　　2.1PCNA在良性、恶性卵巢肿瘤的表达总阳性率分别为15%、65.2%，有显著性差异（P<0.01），见表1。

　　2.266例卵巢癌中PCNA的表达与临床分期、组织分化、淋巴结转移的关系表明，PCNA表达总阳性率与临床分期无关（P=0.435），但阳性+强阳性率在临床Ⅰ、Ⅱ期明显低于Ⅲ、Ⅳ期（P<0.05）；有淋巴结转移组的PCNA的总阳性率及阳性+强阳性率均较无淋巴结转移组的高（P<0.05），见表2。

　　3讨论

　　卵巢肿瘤是女性生殖器常见肿瘤，由于缺少有效的早期诊断方法，卵巢恶性肿瘤5年存活率至今仍较低，PCNA为与细胞增殖活性相关的蛋白；近几年，分子肿瘤学研究表明，细胞周期调节失控在恶性肿瘤发生中起着关键作用。PCNA随细胞增殖周期的不同而变化，G1后期开始增加，S期达高峰，G2、M期又降低，其变化与DNA合成一致，这说明PCNA参与DNA合成，而DNA的合成又是肿瘤细胞分裂增殖的必要条件。因此，被视为能较可靠地反映细胞群体增殖活性的客观指标。国外学者对全身不同部位的癌肿进行PCNA免疫组化研究，多数认为PCNA与肿瘤组织分级、临床分期、淋巴结或脏器转移及不良预后有关[3，4]。

　　本实验结果同时显示：PCNA的表达总阳性率与卵巢癌的临床分期、组织分化、淋巴结转移均相关，即PCNA表达在临床分期Ⅰ-Ⅱ期、高分化、无淋巴转移组明显低于临床分期Ⅲ-Ⅳ期、低分化、有淋巴转移组，提示PCNA表达与卵巢癌的进展及癌细胞的增殖、转移有关，这一结果与文献报道一致[5，6]。

　　因此，测定PCNA表达对鉴别卵巢肿瘤的良恶性、估计卵巢癌预后有一定的实用价值。

　　参考文献：

　　[1]曹泽毅主编.中华妇产科学第2版.北京：人民卫生出版社，2004：2154.

　　[2]连利娟主编.林巧稚妇科肿瘤学.人民卫生出版社，2006：512.

　　[3]KawaiT，SuzukiM，KonoS，etal.Proliferatingcellnuclearantigenandki-67inlungcarcinoma，correlationwithDNAflowcyctometricanalysis.Cancer1994；74（9）：2468.

　　[4]NgIo，LaiEC，FanST，etal.Prognosticsignificanceofproliferatingcellnuclearantigenexpressioninhepatocellularcarcinoma.Cancer1994；73

　　[5]WongCD，ShiST，ZhouQ，etal.ChangesinP53andcyclinDproteinlevelsandcellproliferationindifferentstagesofhumanesophagealandgastric-cardiacar-

　　cinogenesis.IntJCancer1994；59：514～519.

　　[6]朱根海，宁国媛，梁茱等.卵巢癌组织nm23、PCNA的表达及意义.实用肿瘤杂志1999；14（2）：92.

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