急性肺损伤(ALI)是重症急性胰腺炎(SAP)发病一周内死亡的主要原因,目前认为中性粒细胞释放的氧自由基是ALI的主要介质[1]。褪黑素(MLT)是近年来被确认的非酶类抗氧化物质,是已知最强的自由基清除剂。迄今尚未见到MLT在SAP伴发肺损伤作用方面的报道。本文作者建立大鼠SAP动物模型,并给予外源性MLT,通过检测肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及髓过氧化物酶(MPO)活性,观察MLT对SAP肺损伤的治疗作用。

　　1材料与方法

　　1.1动物及试剂健康Wistar大鼠60只,体重300~350g。褪黑素为Sigma公司产品。

　　1.2方法①SAP模型制备:大鼠实验前禁食12h,自由饮水,麻醉、开腹后在手术显微镜下行胆胰管末端逆行穿刺,同时阻断上段胆总管,以精密输液泵注入5%去氧胆酸钠(Flaka公司)溶液(1mlokg-1体重),速度0.2mlomin-1,假手术组(shamoperation,SO)大鼠仅做剖腹探查术。②实验分组:大鼠随机分为SAP+NS组(n=24)、SAP+MLT组(n=24)和SO组(n=12)。SAP+MLT组术后0、6h分次于背部皮下注入含MLT(50mgokg-1体重)的生理盐水8ml;SAP+NS组及SO组注入等容积的生理盐水。③观察项目:术后6及12h分别处死大鼠,取材测定肺脏湿/干重比、肺组织MPO活性[2]、肺组织MDA含量(采用TBA显色法)、肺组织GSH-PX活性(采用DTNB直接法)及肺组织SOD活性(采用化学发光法[3])。

　　1.3统计学方法两组均数差异的t检验。

　　2结果

　　2.1肺湿/干重比变化SAP制备后6h肺湿/干重比(4.26±0.32)较SO组显著增高(3.05±0.20),P<0.05,至12h达峰值(6.38±0.71);SAP+MLT组术后6、12h分别为3.67±0.23和4.02±0.58,显著低于SAP+NS组各相应时点值(P<0.05)。

　　2.2肺组织MPO活性变化SAP制备6h肺组织MPO活性[(3.24±0.76)Uog-1组织]较SO组显著增高[(1.87±0.39)Uog-1,P<0.05],12h高达(6.13±0.86)Uog-1;SAP+MLT组术后6、12h分别为(2.15±0.31)和(2.96±0.73)Uog-1,明显低于SAP+NS组相应时点值(P<0.05)。

　　2.3肺组织MDA含量、SOD活性及GSH-PX活性变化SAP建模后6h,肺组织MDA含量较SO组显著升高(P<0.05),12h进一步升高,SAP+MLT组术后6、12h值明显低于SAP+NS组6、12h值(P<0.05)。SAP建模后6、12h肺组织抗氧化酶SOD、GSH-PX活性较SO组显著下降(P<0.05),SAP+MLT组术后12h明显高于SAP+NS组12h时值(P<0.05)。

　　2.4肺脏病理改变SAP+NS组肺脏肉眼观出血、水肿明显,有点状出血斑,光镜下6h可见肺内小血管扩张充血,肺泡隔增宽,间质中粒细胞浸润多见,12h时肺脏病理改变明显,间质粒细胞浸润加重,伴有肺泡破裂出血;SAP+MLT组,肺脏病理改变明显减轻,6~12h时肺泡隔略增宽,粒细胞浸润明显较SAP+NS组轻,毛细血管充血不明显。

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