[摘要] 目的 研究医用多糖止血愈合海绵辅助敷料的阻菌作用。 方法 参考YY/T 0471.5-2004接触性创面敷料实验方法，以医用水刺无纺布为对照，检验医用多糖止血愈合海绵辅助敷料对粘质沙雷菌及溶藻弧菌的阻隔效能。 结果 医用多糖止血愈合海绵的辅助敷料，对金黄色葡萄球菌气溶胶具有隔菌性能，在低水分条件、半潮湿条件及潮湿条件下对粘质沙雷菌或溶藻弧菌均有阻菌性能。 结论 医用多糖止血愈合海绵的辅助敷料具有阻菌作用。

　　[关键词] 阻菌；粘质沙雷菌；溶藻弧菌

　　[中图分类号] R187.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2014）09（c）-0031-04

　　Effect of bacteria resistance of medical polysaccharide hemostatic healing sponge's secondary dressing

　　XU Hongxia1 YU Yan1 ZHANG Binbin2 WANG Xiaoyang3 WANG Fenghua4 JIANG Yi3

　　1.Burns and Plastic Surgery， PLA Navy General Hospital， Beijing 100048， China； 2.Department of Pharmacy， 201st Hospital of PLA， Liaoning Province， Liaoyang 111001， China； 3.Department of Respiratory Medicine， PLA Navy General Hospital， Beijing 100048， China； 4.Jiangsu Changjiyong Bio-Technology Co.， Ltd.， Jiangsu Province， Zhenjiang 212000， China

　　[Abstract] Objective To study the bacteria resistance of the medical polysaccharide， China accharide hemostatic healing sponge. Methods The test method for primary wound dressing YY/T 0471.5-2004 was referenced， a medical spunlaced nonwoven was as control， the effect of bacteria resistance of the secondary dressing was inspected. Results Medical polysaccharide hemostatic healing sponge's secondary dressing had bacterial isolation performance against staphylococcus aureus aerosol， and bacteria resistance performance against serratia marcescens or vibrio alginolyticus under low moisture conditions， semi wet conditions and wet conditions. Conclusion Medical polysaccharide hemostatic healing sponge's secondary dressing has the effect of bacteria resistance.

　　[Key words] Bacteria resistance； Serratia marcescens； Vibrio alginolyticus

　　在外伤止血尤其是战伤止血材料的研究中，以多聚糖类为主要成分的止血材料占据了重要地位。医用多糖止血愈合海绵是由江苏昌吉永生物科技有限公司研发的，是具有止血及愈创作用的新型创面敷料，其功能性部分为疏松多孔的海绵状结构，阻隔细菌性能较差，而远隔创面，起衬托、固定等作用的辅助敷料结构致密，为一层疏水膜，具有阻菌、阻水、透湿等性能，在实际使用中辅助敷料的外径超过功能性部分，起到隔离外界物质接触创面的作用。本研究以此辅助敷料作为实验对象，研究其阻隔细菌的性能。现报道如下：

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 菌种 金黄色葡萄球菌标准菌株（ATCC25923）、粘质沙雷菌临床分离株、溶藻弧菌临床分离株均由解放军海军总医院检验科提供。分别在培养基上增菌后可见典型菌落，并且能够正常传代。

　　1.1.2 敷料 实验组：医用多糖止血愈合海绵的辅助敷料（江苏昌吉永生物科技有限公司，专利号：2012204 33377.2），厚约0.38 mm的单层疏水膜；对照组：医用水刺法无纺布。两种敷料经裁剪后予以环氧乙烷消毒。

　　1.2 隔菌性能实验

　　将40 mm×40 mm方形灭菌后敷料，用无菌操作平置于琼脂糖培养基平皿中，培养基表面喷洒金黄色葡萄球菌气溶胶，盖上培养皿盖，置37℃培养24 h，观察敷料覆盖处与未覆盖处菌落生长状况。将去除敷料后的培养基置37℃继续培养24 h，观察覆盖处与未覆盖处菌落的生长状况。每组敷料连续操作3次。

　　1.3 低水分条件下的阻菌性能实验

　　低水分条件是指材料的两面都不湿的材料条件。用20～25℃的营养肉汤培养粘质沙雷菌24 h，获得菌含量约109个/mL。用无菌金属丝接种环浸沾实验菌液，在琼脂糖培养基平皿上接种一个“×”形，每一个交叉线的长度不超过20 mm。将培养皿置20～25℃下培养24 h，使菌落生长。将无菌敷料（60 mm×60 mm方形）平置于培养皿中，使其覆盖“×”状的细菌培养物，并粘贴紧。将琼脂糖培养基和其上的敷料完整倒置在羊血琼脂平皿上，使三者完全接触，加盖。将整个培养皿置于20～25℃培养24 h。取下上层的琼脂糖培养基和敷料，羊血琼脂平皿加盖并置20～25℃下继续培养24 h。检查该血平皿被敷料覆盖表面上是否有粘质沙雷菌生长。每组敷料连续操作3次。溶藻弧菌实验方法同上。

　　1.4 半潮湿条件下的阻菌性能实验

　　半潮湿条件是指材料的一面是湿的材料条件，即敷料外部有水分浸湿的情况。用20～25℃的营养肉汤培养粘质沙雷菌24 h，获得菌含量约109个/mL。将无菌敷料 （60 mm×60 mm方形）平置于无菌营养琼脂培养基平皿上，用无菌移液管向敷料上滴5滴（0.2 mL/滴，四角部和中央各一滴）培养菌液。置20～25℃下培养24 h。培养结束后，用无菌移液管从敷料上将培养菌液吸除，用无菌镊子将敷料从琼脂表面取下。将培养皿置20～25℃下培养24 h。检查培养皿，观察敷料覆盖的表面积内是否有粘质沙雷菌生长。每组敷料连续操作3次。溶藻弧菌实验方法同上。

　　1.5 潮湿条件下的阻菌性能实验

　　潮湿条件是指材料的两面都是湿的材料条件。用20～25℃的营养肉汤培养粘质沙雷菌24 h，获得菌含量约109个/mL。以无菌操作，向无菌培养皿中注入约20 mL无菌营养肉汤，在皿口覆盖一片无菌敷料，使其下部完全接触培养基，向敷料上注入约10 mL菌液，盖上培养皿盖，室温下放置24 h。24 h后移除粘质沙雷菌液，去除敷料，加盖，置20～25℃下培养24 h。检查营养肉汤中是否有粘质沙雷菌生长。每组敷料连续操作3次。溶藻弧菌实验方法同上。

　　2 结果

　　2.1 隔菌性能实验

　　如图1所示，刚揭去敷料时及揭去敷料继续培养24 h后，实验组敷料及对照组敷料的培养基中心原敷料覆盖处无菌落生长，而其余部分则长满细菌，两者之间有明显的界线。重复实验3次，结果相同。

　　a：实验敷料贴于培养基上，喷过金葡菌气溶胶后培养24 h，可见菌落呈金黄色；b：揭去实验敷料，再培养24 h后，见培养基中心原敷料覆盖处无菌落生长，而其余部分则长满细菌，两者之间有明显的界线；c：对照组敷料的实验结果相似

　　图1 隔菌性能实验结果

　　2.2 低水分条件下的阻菌性能实验

　　实验组敷料在低水分条件下阻隔粘质沙雷菌或溶藻弧菌的实验结果如图2所示，重复3次均相同，图2c可见菌落未能透过实验组敷料生长，说明实验组敷料在低水分条件下具有阻菌性能。

　　对照组敷料在低水分条件下阻隔粘质沙雷菌或溶藻弧菌的实验结果如图3所示，重复3次均相同，图3c可见细菌透过实验敷料生长，说明对照组敷料在低水分条件下无阻菌性能。

　　a：琼脂糖培养皿上接种×形菌液，培养24 h后的状态，然后覆盖实验敷料；b：将敷料和培养基倒置于羊血琼脂平皿上，继续培养24 h；c：取下上层的普通培养基和敷料，再培养24 h，可见羊血琼脂平皿上无菌落生长

　　图2 低水分条件下实验敷料的阻菌性能实验结果

　　a：琼脂糖培养皿上接种×形菌液，培养24 h后的状态，然后覆盖对照敷料；b：将敷料和培养基倒置于羊血琼脂平皿上，继续培养24 h；c：取下上层的普通培养基和敷料，再培养24 h，可见羊血琼脂平皿上长满菌落

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