医用多糖止血愈合海绵辅助敷料的阻菌作用(2)
图3 低水分条件下对照组敷料的阻菌性能实验结果
2.3 半潮湿条件下的阻菌性能实验
半潮湿条件是指材料的一面是湿的条件,即敷料外部有水分浸湿的情况。由图4可见,培养基上原实验敷料覆盖处无菌落生长,说明细菌无法穿透敷料,实验敷料在半潮湿条件下具有阻菌性能。
由图5a可见,实验滴加的粘质沙雷菌菌液或溶藻弧菌菌液已经完全浸透对照组敷料;由图5b可见,培养基上原对照组敷料覆盖处菌落生长,并且由于对照敷料本身对菌液的吸收和扩散作用,菌落生长的形状基本符合敷料的形状,说明在半潮湿条件下,对照组敷料无阻菌性能。产生这种结果可能是由于对照敷料一面潮湿后,本身对水分有毛细的吸力作用,水分使样品内部结构疏松,网孔增大,对菌落阻力减小,造成菌落透过对照组敷料而在培养基上生长。
a:实验敷料上滴加菌液后培养24 h的状态;b:揭去敷料后再培养24 h的状态,培养基上未见菌落生长
图4 半潮湿条件下实验组敷料的阻菌性能实验结果
a:对照组敷料上滴加菌液后培养24 h的状态;b:揭去敷料再培养24 h后的状态,可见菌落长满敷料覆盖处的绝大部分
图5 半潮湿条件下对照组敷料的阻菌性能实验结果
2.4 潮湿条件下的阻菌性能实验
潮湿条件是指材料的两面都是湿的材料条件。实验组敷料在潮湿条件下阻隔粘质沙雷菌或溶藻弧菌的实验均重复3次,每次结果相同,实验结果如图6所示,菌液未能透过实验组敷料,说明实验组敷料在潮湿条件下具有阻菌性能。
对照组敷料在潮湿条件下阻隔粘质沙雷菌或溶藻弧菌的实验也重复3次,每次结果相同,如图7所示。由图7a可见室温放置24 h后菌液已经浸透对照组敷料;图7b可见,原清澈的营养肉汤变浑浊,说明对照组敷料在潮湿条件下无阻菌性能。
a:培养24 h后实验组敷料完好,菌液仍维持原状;b:取下敷料,再培养24 h后,见平皿中肉汤清澈
图6 潮湿条件下实验组敷料的阻菌性能实验结果
a:培养24 h后对照组敷料被浸透,其上的菌液消失;b:取下敷料,再培养24 h后,见平皿中肉汤浑浊
图7 潮湿条件下对照组敷料的阻菌性能实验结果
3 讨论
临床上,患者创面的液体渗出量以及敷料的外部有无水分浸湿决定了接触性创面敷料的使用条件,大致可分为低水分条件、半潮湿条件或潮湿条件,在医药行业的国家标准YY/T 0471.5-2004接触性创面敷料实验方法[1]中,按照上述三种不同条件制订了相应的实验方法,用以评价敷料的阻菌性能,本实验借鉴了行业标准[2]及既往文献[3]中的方法进行实验设计,以外科伤口常见的金黄色葡萄球菌、粘质沙雷菌及海水浸泡伤口中常见的溶藻弧菌为实验菌种,研究实验用辅助敷料的阻菌性能。
金黄色葡萄球菌在自然环境中广泛存在,对外环境的抵抗力在无芽胞菌中最强,能在干燥状态下生存,附着在尘埃颗粒和脱屑的上皮细胞上可造成空气源性感染。在人群中金黄色葡萄球菌的带菌率为30%~50%,是医院感染的常见致病菌之一,故选用金黄色葡萄球菌气溶胶来评价敷料的隔菌性能。在隔菌实验中,实验组敷料及对照组敷料的培养基中心原敷料覆盖处均无菌落生长,而其余部分则长满细菌,刚揭去敷料时的状态与揭去敷料继续培养24 h后的状态完全相同,说明是敷料本身的隔菌性能所致,并非敷料的接触抑制使菌落不生长。该项实验说明两种敷料均有隔菌效能,且重复性很好。对照组敷料为医用水刺无纺布,其屏障功能是通过微生物屏蔽层的无数条细纤维无规律纵横交错,形成等效孔径小于50 μm的小孔,从而达到阻菌的性能[4]。
粘质沙雷菌存在于土壤、水和食品中,也存在于人的呼吸道和消化道中,是条件致病菌。近年来,它在医院感染中已成为重要的病原菌,在个别救护中心已成为创面检出的主要菌种之一,并且因其菌体细小,也是用来衡量穿透性能的最佳细菌。粘质沙雷菌在20℃条件下培养可产生灵菌红素,菌落为红色,本研究使用的是临床分离株,不产生色素[5],琼脂糖培养基及羊血培养基上的菌落为白色。而溶藻弧菌属于嗜盐性海生弧菌,为海洋环境的主要优势菌种之一,生物学特性与副溶血弧菌极为相似,是沿海地区腹泻和食物中毒的常见病原菌[6-11],早在1973年就有人指出溶藻弧菌对人类有致病作用,主要引起创伤性感染和败血症等肠道外感染,如蜂窝组织炎、中耳炎、脓毒血症等,因为实验组敷料同时具有阻水性能,故选择溶藻弧菌作为海水菌的代表菌种。
实验组敷料在低水分条件、半潮湿条件及潮湿条件下阻隔粘质沙雷菌或溶藻弧菌的实验证实细菌未能透过实验组敷料生长,说明实验组敷料阻菌性能良好。实验组敷料为聚四氟乙烯(PTFE)膜外喷涂聚氨酯制成,PTFE具有优良的化学稳定性、耐腐蚀性、电绝缘性和良好的抗老化耐力,但PTFE膜为丝状PTFE压制而成,孔径较大,而带涂层的PTFE复合膜可明显提高其防水性及阻隔性能[12-14],外涂聚氨酯后孔径约为0.45 μm,而较小的粘质沙雷菌直径约0.5 μm,无法透过实验组敷料。
对照敷料在低水分条件、半潮湿条件及潮湿条件下阻隔粘质沙雷菌或溶藻弧菌的实验证实细菌可透过对照组敷料生长,原因可能是由于对照组敷料相对于实验组敷料而言,敷料纤维间孔径较大,对细菌阻隔差,在含水分条件下细菌容易透过对照组敷料而在培养基上生长。
总的来说,实验组敷料,即医用多糖止血愈合海绵的辅助敷料,对金黄色葡萄球菌气溶胶具有隔菌性能,在低水分条件、半潮湿条件及潮湿条件下对粘质沙雷菌或溶藻弧菌均有阻菌性能。
[参考文献]
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