1.4数据分析
　　试验数据以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS19.0统计软件分析结果，组间差异采用两样本均数比较t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
　　2结果与分析
　　2.1Na2S2O4对EA.hy926细胞存活的抑制结果
　　在EA.hy926细胞中加入不同浓度Na2S2O4作用24h后，高浓度组细胞形态发生了明显的变化，细胞停止增殖、细胞膜皱缩、细胞形态不规则、部分细胞悬浮未贴壁、黑色代谢产物增加等（图1）。与对照组相比，细胞的生存能力剂量依赖性的减弱，说明Na2S2O4对EA.hy926细胞的增殖具有抑制作用，用SRB法检测抑制率可以看出，当Na2S2O4浓度降到2mmol/L以下时，对细胞无明显的抑制作用（表1，图1）。根据不同浓度抑制率做四参数曲线拟合计算出Na2S2O4的IC50为3.021，表明在3mmol/LNa2S2O4下抑制了50%细胞的生存能力，因此在实际过程中选用大于IC50的浓度8mmol/L进行后续试验，抑制率为88.81%，可以更大程度地体现出苞叶雪莲粗提物的保护作用。
　　2.2苞叶雪莲粗提物对Na2S2O4造成细胞缺氧的保护作用
　　在EA.hy926细胞上用8mmol/LNa2S2O4造成缺氧模型之后，加入不同浓度的苞叶雪莲粗提物，从细胞存活率和细胞形态两个方面观察其保护作用。苞叶雪莲粗提物10.00mg/mL浓度下可极显著增加缺氧细胞的存活率（P<0.01），与对照组相比的相对存活率是缺氧模型组的6.3倍，说明在该浓度下缺氧导致的细胞凋亡和增殖抑制这些负面作用被苞叶雪莲粗提物大部分中和，与缺氧模型组相比具有极显著差异（表2）。5.00、2.50mg/mL苞叶雪莲粗提物可以保护细胞，与缺氧模型组相比，相对存活率增加，差异达到显著水平（P<0.05）；当苞叶雪莲粗提物浓度下降到1.25mg/mL以下时，保护作用不明显。
　　从细胞形态学变化上观察，苞叶雪莲粗提物可剂量依赖性地保护细胞，免于缺氧造成的细胞凋亡、萎缩、增殖抑制，其中10.00mg/mL浓度下保护作用最为明显，细胞形态基本完整，悬浮较少，细胞代谢产物相对减少，细胞融合率显著增加。降低浓度后苞叶雪莲粗提物仍可以保护细胞形态完整，这种保护作用在0.08mg/mL浓度下仍可从拍照图片中观察出（图2）。
　　3小结
　　苞叶雪莲粗提物从1.25mg/mL浓度开始呈剂量依赖性地增加了缺氧模型组中EA.hy926细胞的相对存活率，在10.00mg/mL浓度下与Na2S2O4模型组相比，极显著增加了细胞相对存活率，是缺氧模型组的6倍以上，表明苞叶雪莲具有很强的抗缺氧损伤能力。这一结果在动物试验中已经初步得到了验证，其主要作用成分值得进一步分化探讨，力求得到抗缺氧有效的单一组分，在临床应用中明确其成分，确定使用剂量和安全性。
　　参考文献：
　　[1] 杨国愉，冯正直，汪 涛.高原缺氧对心理功能的影响及防护[J]. 中国行为医学科学，2003（4）：116-118.
　　[2] 田淑琴，张 琦，刘述皇，等.苞叶雪莲的药理研究[J].中药新药与临床药理，1998（3）：42-43，64.
　　[3] 毕良文，李文辉，段 伟，等.苞叶雪莲水提物对辐射损伤小鼠防护作用的研究[J].现代肿瘤医学，2009，17（7）：1218-1221.
　　[4] 郭 娜，李文辉，张国良，等.苞叶雪莲水提物对小鼠生殖细胞辐射防护作用的研究[J].中国辐射卫生，2010（4）：394-396.
　　[5] 张国良，李文辉，郭 娜，等.苞叶雪莲水提物对小鼠免疫系统辐射防护作用的研究[J].中国辐射卫生，2011（2）：135-136，139.
　　[6] 许蜀闽，王培勇，马红英.连二亚硫酸钠在建立培养细胞的无氧环境中的应用[J].第三军医大学学报，2005（4）：359-360.
　　[7] 胡海燕，崔志慧，陈 翔，等.清心开窍方含药脑脊液对连二亚硫酸钠所致PC12细胞损伤的保护机制研究[J].中国中药杂志，2013（9）：1314-1317.
　　[8] SUN J， LI Y Z，DING Y H，et al. Neuroprotective effects of gallic acid against hypoxia/reoxygenation-induced mitochondrial dysfunctions in vitro and cerebral ischemia/reperfusion injury in vivo[J].Brain Research， 2014，1589（17）：126-139.
　　[9] AHN K，PAN S， BENINGO K，et al. A permanent human cell line（EA.hy926） preserves the characteristics of endothelin converting enzyme from primary human umbilical vein endothelial cells[J].Life Sciences，1995，56（26）：2331-2341.

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