高效液相色谱法测定连花清瘟颗粒中连翘酯苷A含量
摘要:目的 建立连花清瘟颗粒中连翘酯苷A含量的高效液相色谱测定方法,为更好地控制连花清瘟颗粒质量提供参考。方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,流动相为乙腈-0.4%冰醋酸(15∶85),流速为1 mL/min,柱温为室温,检测波长330 nm。结果 连翘酯苷A在0.1~1.4 μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=1240X-16.82(r=0.999 9),平均回收率为101.53%,RSD=1.71%。结论 本方法准确、可靠、重复性好,能测定连花清瘟颗粒中连翘酯苷A含量,可作为连花清瘟颗粒质量控制的含量检测方法。
关键词:连花清瘟颗粒;连翘酯苷A;高效液相色谱法
Abstract: Objective To provide a better reference for the quality control of Lianhua Qingwen Granules by establishing the method for the content determination of Forsythoside A in Lianhua Qingwen Granules by HPLC. Methods The chromatographic conditions were Agilent C18 as chromatographic column, acetonitrile-0.4% acetic acid (15∶85) as the mobile phase; the flow rate was 1.0 mL/min; the column temperature was at room temperature; the detection wavelength was 330 nm. Results Forsythoside A was in a good linear range between 0.1–1.4 μg; regression equation was Y=1240X?16.82 (r=0.999 9); the average recovery was 101.53%, RSD=1.71%.Conclusion The method is accurate, reliable, and with good repeatability, which can be used for the content determination of Forsythoside A in Lianhua Qingwen Granules and the quality control of Lianhua Qingwen Granules.
Key words: Lianhua Qingwen Granules; Forsythoside A; HPLC
连花清瘟颗粒收载于2010年版《中华人民共和国药典》第二增补本,同时收载的其他剂型还有连花清瘟片、连花清瘟胶囊[1],均由连翘、金银花、麻黄(炙)、苦杏仁(炒)、石膏、板蓝根、绵马贯众、鱼腥草、广藿香、大黄、红景天、薄荷脑、甘草13味中药组成。该组方源于麻杏石甘汤与银翘散,功能清瘟解毒、宣肺泄热,临床广泛用于中医辨证属表寒里热证患者的治疗,对非重症社区获得性肺炎在联合西医抗感染治疗的基础上治愈率更高,安全性好[2-4]。关于连花清瘟颗粒及另2个剂型的质量标准,目前只收载了连翘苷的含量测定项,未见制剂中连翘酯苷A的含量测定及限度规定。本研究建立高效液相色谱法(HPLC)测定其主要成分连翘酯苷A含量的方法,为提高该制剂质量标准提供依据。
1仪器与试药
安捷伦1100液相色谱仪,CHEM32工作站,G1314AUV检测器;色谱柱kromasilC18(4.6mm×250mm,5μm);超声波清洗器KQ-100(昆山市超声仪器有限公司)。
连翘酯苷A对照品购自中国食品药品检定研究院,供含量测定用(批号111810-201304);连花清瘟颗粒为市售,北京以岭药业有限公司生产(批号1402080、1403004、1403079);乙腈,甲醇为色谱纯,冰醋酸为分析纯,水为娃哈哈纯净水。
2方法与结果
2.1溶液的制备
2.1.1对照品溶液的制备称取连翘酯苷A对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液,即得。
2.1.2供试品溶液的制备取本品适量,研细,取约1.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇25mL,密塞,称定质量,超声处理(功率100W,频率40kHz)30min,取出,放冷,再称定质量,用70%甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2.1.3阴性对照溶液的制备取阴性样品(除连翘外其他药材制成的成药),按“2.1.2”项下方法制备,即得。
2.2色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-0.4%冰醋酸(15∶85)为流动相,检测波长330nm,流速1mL/min,进样量10μL,理论板数按连翘酯苷A峰计算不低于3000[5]。
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