软腐菌识别侵染魔芋根部影响因子的研究
摘要:魔芋(Amorphophallus Konjac)软腐病频发已成为制约魔芋种植业发展的瓶颈。目前对其病原、发病规律及防治方法等进行了一些研究,加深了对魔芋软腐病的认识,取得了一定进展,但对魔芋软腐病的侵染和发病机制缺乏系统而深入的研究。通过测定软腐菌(Pectobacterium carotovora subsp.carotovora)在魔芋根表吸附量和根部侵入量,研究不同温度、pH、接种浓度、LPS和EPS对软腐菌在魔芋苗根部吸附和侵入过程的影响。结果表明,软腐菌在魔芋苗根部吸附侵入的最适温度条件是30 ℃、pH 6.0,随接种浓度增加吸附和侵入量增加;菌体LPS是魔芋软腐欧文氏菌对寄主根表的吸附所不可缺少的成分,而EPS预处理对吸附侵入量影响较小。本研究明确不同外界因子(温度、pH、接种浓度)和细菌识别子(EPS和LPS)在软腐菌吸附识别魔芋根际中的作用,从源头上了解软腐菌对魔芋根系的侵染机制,为研究病害循环和制订防治策略提供新的启示,从根本上有效控制魔芋病害的发生,并为魔芋的抗病育种提供新思路。
关键词:魔芋(Amorphophallus Konjac);软腐菌(Pectobacterium carotovora subsp.carotovora);吸附;侵入
中图分类号:S792.39 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)23-5734-04
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.23.027
魔芋(Amorphophallus Konjac)是自然界中唯一高含葡甘聚糖的特种经济作物,其在食品、医药保健、工业材料等方面用途广泛[1]。随着加工产业的快速壮大,其种植面积也迅速扩大,据2013年中国魔芋产业发展研讨会统计,2013年全国魔芋种植面积已达 169.31 万亩。但在魔芋种植过程中,魔芋软腐病病原为软腐菌(Pectobacterium carotovora subsp.carotovora),一般减产20%~30%,严重的达80%,甚至绝收[2]。
自二十世纪八十年代发现魔芋软腐病以来,对其病原、发病规律及防治方法等进行了一些研究,加深了对软腐病的认识,取得了一定进展,但对魔芋软腐病的侵染和发病机制缺乏系统而深入的研究。很多学者根据软腐病菌的侵染特性,认为魔芋软腐病病原菌是从自然孔口和伤口侵入。Wu等[3]研究发现,在魔芋软腐病系统中,软腐菌可以通过魔芋根系的吸附侵入,导致病害的发生。
病原细菌与寄主植物在根系的相互作用包括一系列的连续反应,由接触、吸附到定殖及其间的相互识别,然后侵人并潜伏,最后导致寄主发病[4]。因此,研究软腐病如何识别、吸附、侵染根系的机理,对确定生产中防治重点有重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料
Pectobacterium carotovora subsp.carotovora为湖北省农业科学院经济作物研究所实验室保存(Genbank注册号FJ463871)。魔芋组培苗由湖北省农业科学院经济作物研究所实验室提供,高度6~8 cm,生根15~20 d,根长约2 cm。
1.2 试验方法
1.2.1 菌种制备 将供试菌株在NA培养基30 ℃培养24 h,用无菌水配制成细菌悬浮液,稀释平板计数,备用。
1.2.2 不同温度条件下软腐菌在魔芋根表吸附量和根部侵入量测定 取配好的浓度为6×107个/mL细菌悬浮液50 mL装入250 mL培养瓶中,分别置于15、20、25、30、35℃的光照培养箱内,待菌悬液的温度与培养箱内温度一致后,将魔芋苗放入其中,根部完全浸没到悬浮液中,每组处理3棵魔芋苗,在浸根接种后0.5、1.0、2.0、4.0、6.0 h分别剪取幼根,测定不同温度条件下软腐菌根表吸附量和根部侵入量。设3次重复,结果取平均值,利用Excel进行数据处理。
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