在子宫内膜癌中的表达及意义
子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤,近年来其发病率在明显上升[1];已引起人们的关注。研究表明,子宫内膜癌的发生和发展与癌基因的激活、抑癌基因的失活和细胞周期调控失常有关[2]也与雌激素的长期刺激有关[3]本文旨在应用P53 、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)3种肿瘤标志物对子宫内膜癌进行联合检测,探讨其在此癌中的表达及临床意义。
1. 材料与方法:
1.1 标本来源和取材 收集近6年来临床手术切除的子宫内膜癌组织标本66例(年龄42-82岁,平均57岁);子宫内膜非典型增生病变29例(年龄37-72岁,平均51.9岁);正常子宫宫内膜31例。组织取材后经20%福尔马林固定、石蜡包埋、连续切片(片厚4mm).一张用做HE染色病理组织学诊断,其余备做免疫组化用。
1.2 试剂 S-P免疫组化试剂盒及P53、ER、PR抗体,均购自福州迈新生物公司产品。
1.3 实验方法 采用目前国内先进的S-P免疫组化方法:步骤:(1)石蜡切片4cm厚,常规脱蜡水化后,用PBS(PH=7.4)冲洗3次,每次5min;(2)加50ul过氧化酶阻断溶液,室温下孵育10min;(3)PBS(PH=7.4)冲洗3次,每次5min;(4)加50ul非免疫组化动物血清,室温下孵育5min,PBS(PH=7.4)冲洗1次;(5)加50ul第一抗体,室温下孵育60min;(6)PBS(PH=7.4)冲洗3次,每次5min;(7)加生物素标记的第二抗体,室温下孵育10min ;(8)PBS(PH=7.4)冲洗3次,每次5min;(9)加50ul链亲和素—过氧化酶溶液,室温下孵育10min;(10)PBS(PH=7.4)冲洗3次,每次5min;(11)加两滴新鲜配制的DAB溶液显色;(12)自来水冲洗,苏木素复染,中性树胶封固。
1.4 结果判定:光镜下随机观察10个高倍视野,计数100个细胞,以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性,计算阳性细胞百分率,结果分级标准:阳性百分率<10%为(-),10%—50%为(+) ,>50%为(++)。
1.5 统计学处理:各组差异显著性检验采用X2检验方法进行。
2 结果
2.1 HE病理组织学诊断 经病理组织学确诊为子宫内膜癌66例,并按细胞分化分为Ⅰ级44例、Ⅱ级17例、Ⅲ级5例;子宫内膜非典型增生病变29例;正常子宫内膜31例。
2.2 P53在3种组织中的表达,3种组织中P53的阳性率分别为87.1%(27/31)、75.8%(22/29)、53.0%(35/66),子宫内膜癌的阳性率与子宫非典型增生病变和正常子宫内膜比较,分别有显著性和非显著性差异(P<0.05和P<0.01)。
注:与子宫内膜癌比较:1) P<0.05; 2) P<0.01。
2.3 ER、PR在子宫内膜癌中的表达(表2),在66例子宫内膜癌中ER、PR的阳性表达率分别为56.0%(37/66)和53.0%(35/66),二者间无明显差异。
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