缺血预处理对兔肝细胞冻存的影响(2)
2.3各组ALT检测比较
各组不同时间冷冻复温后分别取样进行培养,并于培养24h后分别取细胞上清液,检测ALT。结果为:①2周时各组比较差异有统计学意义(P=0.00<0.05)。两两比较后发现,IPC5组与IPC10组比较差异无统计学意义(P=0.21>0.05),IPC5组=IPC10组0.05),IPC5组≈IPC10组0.05),IPC5组≈IPC10组3讨论
自1986年Murry等[21]在对心肌组织的研究中发现缺血预处理效应以来,对于各种组织器官的缺血预处理的相关研究就在不断的进行中,到目前为止已取得了许多重要成果,但仍然存在许多尚未解决的难题,其中之一就是对于不同的器官如何选择合适的预处理时间,从而对器官达到最佳的保护作用以及如何将这一保护作用运用到其它相关的研究中。
缺血预处理的保护作用在多种器官中都普遍存在,其具体机制尚未完全明确。不同的研究器官采用的缺血预处理的时间不同,比如Murry等[21]在研究狗的心肌IRI中使用的是5min阻断,5min开放的预处理方式,而Clavien等[22]开展的临床研究中采用的方式是10min阻断,10min开放的预处理方式等等。脑的预处理方式一般为1~2min,心肌试验多采用3~5min,骨骼肌一般为5min[9]。不同的试验者研究的结果可能不同,比如对于肝组织,Yadav等[7]曾对照研究了15min预处理方式,结果显示与5min的处理方式无明显区别。而其他研究则显示[9,23],5min预处理与15min预处理是有差异的。
目前深低温保存是肝细胞长期保存的主要方法[5-6,24-26],影响其冻存效果的因素有很多,比如:冻存保护剂的选择、冻存剂的浓度、细胞的浓度、降温和复温方法等等。正是基于上述已知的冻存肝细胞较为适宜的因素基础上进行的本次实验,结果显示了对于兔肝脏进行不同时间的缺血预处理后分离保存,5min组和10min组可以增强肝细胞的冻存效果,两者无统计学差异,而15min组不但没起到保护作用反而增加了肝细胞的破坏。
本实验初步探讨了不同时间缺血预处理对于兔肝细胞深低温保存的影响,得出了上述结论,但是,实验结果受研究条件、方法和实验对象等多因素的影响,可能会造成结果出现一定的差异。此外,本实验尚存有一些亟待解决的难题和值得探讨的方面:①缺血预处理的机制。②最佳缺血处理的时间。③不同时间缺血预处理保护作用在不同的种属之间可能有差异。④不同方式缺血预处理的比较,等等。因此今后仍需继续进行该课题的相关研究,进一步探讨缺血预处理的临床应用价值。
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