体外冲击波对大鼠冈上肌腱止点损伤重建后腱—骨愈合进程的影响
[摘要]目的研究体外冲击波能否促进大鼠冈上肌腱止点重建后腱-骨界面的愈合进程。方法将健康雄性SD大鼠(35只)随机分为干预组(体外冲击波,16只))和对照组(16只),剩余大鼠备用。建立冈上肌腱止点重建动物模型后,干预组(冲击波)术后次日始,予以冲击波连续治疗7d,1次/d;对照组不接受冲击波治疗。于术后7、14、28、56d分别取4只大鼠损伤重建侧肱骨头标本,行不脱钙切片、染色(HE)、镜下观察(200×),比较两组各时间点腱-骨交界区组织结构变化趋势。结果干预组腱-骨界面愈合过程较对照组快2~4周。结论体外冲击波可加快大鼠冈上肌止点重建后腱-骨交界区组织愈合进程。
[关键词]肩袖损伤;腱-骨愈合;体外冲击波;病理学分析
[中图分类号]R-33[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2013)12(a)-0010-03
近年来,我国肩袖损伤在肩部疾患中占相当高的比例,治疗方法较多,主要分为保守和手术重建两类,前者常出现肩关节僵硬等后遗症,后者常发生腱-骨不愈合、再次断裂。有研究认为,肩袖损伤临床疗效不满意的主要原因是肌腱-骨的愈合缓慢。近年来,一些研究显示体外冲击波可加快骨-肌腱结合部的愈合速度,但尚未形成共识。本研究应用体外冲击波干预大鼠肩袖损伤止点重建模型,观察冲击波对肩袖损伤后腱-骨界面愈合的影响。
1材料及方法
1.1实验动物及设备
健康雄性SD大鼠35只,随机分为2组:冲击波干预组(16只)、对照组(16只),其余3只备用。切片机(德国Leica公司),显微镜(OLYMPUS),Dolorclast放射冲击波治疗机(瑞士)。本次实验动物均由苏州大学动物实验中心提供。
1.2建立动物模型
选择大鼠右侧肩袖作为手术侧。3.6%的水合氯醛腹腔注射麻醉(1ml/100g),于肩胛冈远端前内侧作1.0cm切口,显露冈上肌腱,于大结节止点处切断,在大结节处用0.5mm克氏针建骨隧道,不吸收缝线牵引、固定冈上肌腱于骨道内。术后予青霉素200000U/d肌注3d,不制动分笼饲养。
1.3冲击波干预及标本采集
术后次日始,干预组SD大鼠右肩部均匀涂抹耦合剂,给予冲击波治疗,单次冲击量500次(频率5Hz,压力2kPa),能量密度流为0.16mJ/mm2,1次/d,持续7d;对照组不予冲击波干预。两组分别于术后7、14、28、56d剪取带冈上肌腱的肱骨头标本,4%多聚甲醛4℃下充分固定。
1.4观察方法
标本不脱钙切片,HE染色,在200倍光学显微镜下观察两组各时间点(术后7、14、28、56d)SD大鼠冈上肌止点重建后肌腱-骨界面处组织愈合情况,观察它们的变化趋势。
2结果
2.1术后7d腱-骨交界区变化
对照组腱-骨交界区由毛细血管、炎症细胞、成纤维细胞构成的肉芽组织充填;干预组腱-骨区也见肉芽组织充填,大量炎性细胞聚集,明显较对照组炎细胞多、稠密(图1A、B)。
2.2术后14d腱-骨交界区变化
对照组腱-骨交界区成纤维细胞、炎症细胞较7d前增多,组织结构松散,界限模糊不清;干预组腱-骨交界区组织结合较稠密,但较7d前组织中毛细血管数目多,管壁渐趋完整,而细胞数目比对照组减少,并有少量软骨细胞增生、多量成纤维细胞及少量胶原纤维合成(图1C、D)。
2.3术后28d腱-骨交界区变化
对照组腱-骨交界区比14d前结合紧密,充填的炎细胞、毛细血管数目比14d时减少,成纤维细胞数目比14d时增加,毛细血管壁尚完整,胶原含量较少,排列不规则;干预组腱-骨交界区组织细胞结合较14d前及对照组紧密,可见瘢痕连接,其间炎细胞、成纤维细胞、毛细血管的含量逐渐减少,胶原较前增多,排列渐趋规则。近隧道壁处可见成软骨细胞(核类圆形)渗杂在胶原纤维间(图1E、F)。
2.4术后56d腱-骨交界区变化
对照组腱-骨交界区成软骨细胞、成纤维细胞较28d前增生,胶原纤维合成也增多(但是排列不太规律,仍较杂乱),腱纤维与骨道壁间的连接比术后28d组紧密,但与冲击波干预组相比仍较疏松、不牢固;干预组腱-骨交界区结缔组织连接紧密,炎性细胞、成纤维细胞数量较28d时明显减少,成软骨细胞也明显减少、但排列规则,胶原纤维含量丰富,纤维束间交联增厚,纤维排列规则,腱与骨界面区可见“骨-软骨-胶原”的移行带特征性结构(图1G、H)。
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