补阳还五汤精简方对脑缺血模型大鼠神经功能及脑梗死面积的影响(2)
2.4 数据预处理
按照实验目标和需求进行数据预处理,剔除实验数据中的异常值。鉴于所得数据为小样本,故选用肖维勒准则进行处理。首先计算测定值的残差Vd=xd-—x(1≤d≤n),将不满足计算公式的数据视为异常数据,予以剔除。计算公式如下:|Vd|≥Wn×S。
收集整理神经功能评分、体质量、脑梗死面积比和脑干湿重比的数据,运用Excel软件对各组数据进行预处理,结果保存备用。
3 统计学方法
结合卡方拟合优度检验和两组独立样本t检验法,采用科学计算工具Matlab2010b编程分析各组数据,以检验各组数据的正态性和方差是否相等为基本条件。P<0.05表示差异有统计学意义。
4 结果
4.1 补阳还五汤精简方对大鼠神经功能评分的影响
除假手术组外,其余各组大鼠均存在较大程度的神经功能障碍,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。给药干预7 d后,各组大鼠神经功能均有所改善,补阳还五汤精简方中、低剂量组神经功能评分值变化较为明显,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),给药组中神经功能恢复程度以中剂量组最佳。结果见表1。
4.2 补阳还五汤精简方对大鼠体质量的影响
造模后,假手术组大鼠体质量变化趋势不明显,模型组大鼠体质量呈现小幅震荡上升趋势;补阳还五汤组、补阳还五汤精简方中剂量组在给药后第4日大鼠体质量均呈现显著上升趋势。结果显示,假手术组、补阳还五汤精简方中剂量组大鼠的体质量恢复情况明显好于模型组。结果见图1。
4.3 补阳还五汤精简方对大鼠脑梗死面积的影响
假手术组脑组织呈现深红色,模型组、补阳还五汤组和补阳还五汤精简方高、中、低剂量组大脑左侧皮层均有不同程度的苍白色坏死组织区,即梗死损伤灶。运用Matlab2010b编程分析各组数据,发现均服从正态分布。使用独立样本t检验的方法,检测两两样本之间差异是否有统计学意义。结果表明,药物干预组脑梗死灶面积明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);补阳还五汤精简方中剂量组与原方比较,差异无统计学意义(P>0.05);假手术组与补阳还五汤中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05);补阳还五汤精简方中、低剂量组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),但中剂量比低剂量疗效好,见表2。
4.4 补阳还五汤精简方对大鼠脑干湿重比的影响
药物干预组与模型组比较,脑干湿重比值存在显著差异。给药7 d后,依次将补阳还五汤精简方中、低剂量组和补阳还五汤组与模型组比较,脑干湿重比值组间差异明显(P<0.05);补阳还五汤精简方中剂量组与补阳还五汤组比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组分别与假手术组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。补阳还五汤精简方中、低剂量和补阳还五汤均能在一定程度上降低脑组织的水肿程度,且中剂量为最佳剂量,见表3。
5 讨论
局灶性脑缺血可称为缺血性脑卒中,是脑血管疾病中最为常见的临床类型。它是脑血液供应障碍引起脑组织缺血、缺氧所致,相应区域脑梗死性坏死,大量神经元丧失,产生神经功能缺损的症状和体征。近年来,国内外学者在补阳还五汤及其拆方抗脑缺血的实验、临床方面作了大量研究,表明补阳还五汤及其拆方在调控脑缺血方面有较好疗效[8],符合中医辨证治疗的要求,是临床防治缺血性脑血管疾病引起的中风及中风后遗症的常用方剂,能有效体现气虚血瘀理论。方中黄芪不仅能够提高超氧化物歧化酶的活性,降低脂质过氧化物的含量,还能降低血小板黏附率,减少血栓的概率,增进末梢血液循环、增强机体免疫力;川芎能活血行气,祛风止痛,抑制细胞凋亡;地龙具有溶栓抗凝、降压等作用,可以通过减轻缺血性脑卒中症状,达到抗惊厥、镇静、抗炎、抗损伤的作用。基于此方义,应用黄芪、川芎和地龙3味药组成的补阳还五汤精简方对缺血性脑损伤具有保护作用。
本研究按照科学的实验设计方法,采用肖维勒准则对实验数据进行预处理,剔除异常值,结合卡方拟合优度检验和两组独立样本t检验法,运用Matlab编程比较在SD大鼠MCAO模型中模型组、假手术组、补阳还五汤组和补阳还五汤精简方高、中、低剂量组体质量、脑梗死面积、脑干湿重比等指标的差异性,结果表明补阳还五汤精简方中、低剂量组与模型组的体质量、脑梗死面积和脑干湿重比存在差异(P<0.05),且中剂量组对脑缺血的治疗效果最佳,其疗效优于补阳还五汤组(正常人体剂量),能有效改善模型大鼠的神经功能症状,减小脑梗死面积和脑组织水肿,对脑缺血损伤具有保护作用。
从现有药效学实验研究的文献来看,通常学者围绕研究目的设计实验方案,拟定相关的药效指标和实验分组,运用假设检验等统计学方法分析小样本药效实验的数据,作为支撑实验结论的依据。这种方法所得到的数据不仅样本量小,且受到动物批次、动物体质量、温度、湿度和设备等客观因素影响,不能重复使用。一方面加大了实验设备和动物的消耗,另一方面制约了药效学实验的深入研究。笔者认为可以从药学信息数据元着手,制定相关的实验数据录入标准,为后续构建药效学实验数据分析和共享平台奠定基础,以顺应大数据环境下的药学信息化的发展。
参考文献:
[1] 刘柏炎,沈剑刚,蔡光先,等.补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑内caveolin 1、2的影响[J].湖南中医药大学学报,2008,28(1):22-24,28.
[2] 唐映红,邓常青,刘旺华,等.补阳还五汤4类有效部位对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积的影响[J].中草药,2005,36(2):236-239.
[3] 夏相宜,王宇红,蔡光先,等.脑健胶囊对MCAO大鼠脑水肿、梗死面积及体质量的影响[J].中医学报,2014,29(4):532-534.
[4] 谢渊.补阳还五汤加减法治疗气虚血瘀型脑梗死疗效观察[J].实用心脑肺血管病杂志,2012,20(5):913-914.
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