壳聚糖季铵盐抗植物病原真菌活性的研究
随人们对食品安全和环境安全的重视,开发新型无毒无害的农用抗菌剂成为当前研究热点之一。壳聚糖(CTS)作为一种绿色环保抗菌剂而受到国内外持续关注和研究。壳聚糖是自然界中惟一的碱性多糖[1],不仅来源丰富,而且具有安全无毒、生物相容性好、可生物降解、防腐抗菌[2]、无免疫源性[3]等生物学性能和制粒、拉丝、成膜[4]、吸湿保湿[5]等理化特性,被广泛应用于医药、化工、农业以及生物工程等领域[6]。但是,壳聚糖不溶于水的性质限制了其进一步应用。试验通过烷基化改性壳聚糖制得了水溶性的壳聚糖季铵盐(HTCC),采用傅立叶红外图谱(FT-IR)、氢核磁共振(1HNMR)对其结构进行表征;选取花生尾孢菌(Cercosporaarachidicola)、立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、苹果轮纹病菌(Botryosphaeriaberengriana)、可可刺盘孢(Colletotrichumcoccodes)4种农作物易感病原真菌作为测试菌种,研究了不同浓度、pH、金属离子条件下壳聚糖季铵盐的抗真菌性能,并初步探索其抗菌机理。
1材料与方法
1.1试剂
壳聚糖(脱乙酰度90%),购自天津市久康生物工程有限公司;2,3-环氧丙基三甲基氯化铵(EPTAC),购自上海笛柏化学品技术有限公司;异丙醇、乙醇、醋酸等试剂均为市售分析纯,水为双蒸水。
1.2菌种
花生尾孢菌、立枯丝核菌、苹果轮纹病菌、可可刺盘孢,河北工业大学化工学院生物工程系保藏。
1.3HTCC的合成与表征
6g壳聚糖(粘均相对分子质量为2×104)加入到54mL异丙醇中,搅拌均匀,水浴加热至60℃,加入60mL370mg/mL的EPTAC溶液,水浴升温至80℃,反应10h,离心、弃上清液,沉淀经80%异丙醇洗涤,离心,取沉淀冻干即为HTCC。HTCC用KBr压片,使用TENSOR27型红外光谱仪(德国BrukerOptics公司)对HTCC进行红外光谱分析;使用AVANCE400型核磁共振波谱仪(瑞士BrukerBiospin公司)对HTCC进行氢核磁共振分析。
1.4HTCC抗植物病原真菌活性测定
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